【药厂】消毒剂使用及效力验证

1.

(相关资料图)

消毒剂配制及其注意事项：

按供应商的使用说明进行配制和储存(纯化水、注射用水)

洁净室及相关受控环境使用，应进行除菌过滤。

温度提高，杀菌效力增大。效力验证时，在常温下配制。

2.

影响消毒剂效力的因素有：

pH；温度，浓度；材质和附着物质；溶剂（水）；接触时间；微生物的类型和数量；

3.

消毒剂作用机理:

钝化胞内酶活性，影响细胞的正常代谢（如酚类）

阻断物质运输通道（如季铵盐类（＋电荷），附着于细胞膜特定部分（－电荷））

破坏微生物细胞（膜）的结构和功能（如醛类、含氯、过氧化物）

4.

微生物对消毒剂的耐受性受以下几方面因素的影响：

形成生物膜（粘性多糖物质）

消毒剂的相互作用（中和反应）

固有耐受性和概率残存

致死剂量

5.

微生物抗力由小到大排列一般为：

细菌繁殖体--真菌繁殖体--真菌孢子--病毒--分枝杆菌--细菌芽孢

6.

消毒剂的选择考虑如下因素：

需控制的微生物的类型和数量

市售消毒剂的抗菌谱

消毒剂的品牌

浓度、使用方法和接触时间

待消毒物体的材质和对消毒剂的兼容性

可能影响杀菌效力的表面有机物数量

反复使用，对设备表面的腐蚀程度

对操作者的安全性

和清洁剂/其它消毒剂的相容性

交替使用方案和对产品的影响

7.

消毒剂验证步骤：

第一步：在实验室对代表细菌在规定的使用浓度和规定的作用时间进行确认。

第二步：应用不同材质的载体，进行模拟试验

第三步：完成验证报告，形成SOP。

8.

验证用菌种：

金黄色葡萄球菌、铜绿色假单胞菌、沙门氏菌、大肠埃希菌、枯草杆菌、白色念珠菌、黑曲霉、环境分离菌。

菌种选择的原则:代表性,普遍性,标准菌种。(环境中常见的污染菌)。菌种的要求：不得超过5代。

采用适宜的方法保存。

9.

挑战微生物(USP29)：

10.

准备性试验：

选择适合的中和剂：Letheen肉汤、D/E中和肉汤（酚类，季铵盐类）、TAT肉汤基础＋吐温20＋卵磷脂＋胰蛋白胨

10.1

D/E中和肉汤配方（每升）：

胰蛋白胨5g；酵母膏2.5g；葡萄糖10g；硫乙醇酸钠1g；硫代硫酸钠6g；亚硫酸氢钠2.5g；吐温805g；卵磷脂7g；溴甲酚紫0.02g；最终pH7.6±0.2于25℃；

10.2

准备性试验之中和剂毒性：

将10～100CFU的微生物加入到中和剂中；薄膜过滤，冲洗，培养，计数¢与菌液对照组比较，回收率应>70％

10.3

准备性试验之中和效力：

使用中稀释检测（use-dilutiontests)(对不同浓度下，对消毒剂的效力进行筛选;针对不同标准菌株和环境微生物，确认接触时间)

将消毒剂和中和剂混合（记录时间）

加入10～100CFU微生物¢薄膜过滤，冲洗，培养，计数

与菌液对照组比较，回收率应>70％验证方法

薄膜过滤法：菌悬液和消毒剂直接混合，在不同的时间间隔条件下过滤，培养后评价。

11.

验证准备：

测试菌液准备：增菌过夜，并调整至106～108CFU/ml

消毒剂稀释至规定浓度：分装10ml于若干无菌试管中；试管上标注消毒时间：如“1分钟组”，“5分钟组”，“10分钟组”或其他要求的时间段。

配制中和剂（分装100ml，300ml）验证步骤:

接种：接种各验证菌种至盛有待验证消毒剂的试管（使接后浓度>104CFU/ml)，混合均匀，并立即开始计时。

中和、过滤：将消毒剂倾入100ml中和剂中，混合，稀释（如需要），过滤，然后用100ml中和剂清洗滤膜，滤过3次。

阳性对照：用无菌水代替消毒剂，步骤同上。

培养和计数：取下滤膜放入规定的培养基平板，在规定的温度、时间培养后，记数。和阳性对照相比，微生物数量下降应至少3个对数值（细菌芽孢至少2个对数值）。

表面挑战试验（surfacechallengetests)

使用标准菌株和典型环境分离微生物

选择合适的浓度和接触时间，进行试验

获得挑战微生物数量下降的对数值

对使用新消毒剂前后环境微生物的检出频率和数量进行统计学评估（无菌生产区域、GMP要求）

根据设施的实际情况，选择不同材质的载体（玻璃，不锈钢，塑料薄膜，乳胶，墙面涂料，地面材质）

接种，并确认实际数量

接触杀菌、中和、过滤。

12.

正确使用消毒剂:

① 稀释消毒剂时应用纯化水、注射用水

② 设备使用后彻底清洁

③ 将环境常见菌列入验证范畴

④ 轮换使用不同的消毒剂，消毒剂间要用无菌水充分清洗

⑤ 消毒的SOP：配制、使用、纠正、防护等

⑥ 供应商的审核和确认

13.

消毒剂的文件:

标准操作规程SOP

消毒剂配制记录

消毒剂使用记录

消毒剂标签消毒剂文件，应该等同于原始记录。

内容来源：制药工艺与装备

撰稿人 | 网络

责任编辑 | 胡静

审核人 | 何发